
v
3.4.1 OPTIMALISATIE ..............................................................................................................................................36
3.4.2 OPZUIVERING AMC VAN CP SN .......................................................................................................................37
3.5 BEPALING VAN TOXINEGENEN VAN C. DIFFICILE STAMMEN ..................................................................... 38
3.5.1 OPTIMALISATIE VAN PCR .................................................................................................................................38
3.5.2 AANWEZIGHEID VAN TOXINE A EN TOXINE B GENEN ..............................................................................................38
3.5.3 AANWEZIGHEID VAN BINAIRE TOXINEGENEN ........................................................................................................40
4. DISCUSSIE ................................................................................................................................................... 42
4.1 KARAKTERISATIE AMC VAN B. AMYLOLIQUEFACIENS ............................................................................... 42
4.1.1 MAXIMALE PRODUCTIE AMC ...........................................................................................................................42
4.1.2 INVLOED VAN PH, TEMPERATUUR EN PROTEASEN ..................................................................................................42
4.1.3 EFFECT VAN BA SN OP DARMCELLEN IN VITRO .....................................................................................................42
4.2 OPZUIVERING AMC VAN B. AMYLOLIQUEFACIENS .................................................................................... 43
4.3 SELECTIVITEIT AMC VAN B. AMYLOLIQUEFACIENS .................................................................................... 43
4.4 ANTIBACTERIËLE ACTIVITEIT VAN C. PERFRINGENS .................................................................................. 44
4.4.1 OPTIMALISATIE ..............................................................................................................................................44
4.4.2 OPZUIVERING AMC VAN CP SN .......................................................................................................................44
4.5 BEPALING VAN TOXINEGENEN VAN C. DIFFICILE STAMMEN ..................................................................... 44
4.5.1 OPTIMALISATIE VAN PCR .................................................................................................................................44
4.5.2 AANWEZIGHEID VAN TOXINE A EN TOXINE B GENEN ..............................................................................................45
4.5.3 AANWEZIGHEID VAN BINAIRE TOXINEGENEN ........................................................................................................45
4.6 CONCLUSIE ............................................................................................................................................... 45
5. MATERIAAL EN METHODEN ....................................................................................................................... 46
5.1 KARAKTERISATIE AMC VAN B. AMYLOLIQUEFACIENS ............................................................................... 46
5.1.1 MAXIMALE PRODUCTIE AMC ...........................................................................................................................46
5.1.2 INVLOED VAN PH ............................................................................................................................................46
5.1.3 INVLOED VAN TEMPERATUUR ............................................................................................................................46
5.1.4 INVLOED VAN PROTEASEN ................................................................................................................................46
5.1.5 EFFECT VAN BA SN OP DARMCELLEN IN VITRO .....................................................................................................47
5.2 OPZUIVERING AMC VAN B. AMYLOLIQUEFACIENS .................................................................................... 47
5.2.1 ZUURPRECIPITATIE BA SN ................................................................................................................................47
5.2.2 SOLID PHASE EXTRACTION CHROMATOGRAFIE .......................................................................................................48
5.2.3 HIGH PRESSURE LIQUID CHROMATOGRAFIE ..........................................................................................................48
5.2.4 HPLC-ESI MASSASPECTROMETRIE .....................................................................................................................48
5.3 SELECTIVITEIT AMC VAN B. AMYLOLIQUEFACIENS .................................................................................... 48
5.4 ANTIBACTERIËLE ACTIVITEIT VAN C. PERFRINGENS .................................................................................. 49
5.4.1 OPTIMALISATIE ..............................................................................................................................................49
5.4.2 OPZUIVERING AMC VAN CP SN .......................................................................................................................49
5.5 BEPALING VAN TOXINEGENEN VAN C. DIFFICILE STAMMEN ..................................................................... 50
5.5.1 OPTIMALISATIE VAN PCR .................................................................................................................................50
5.5.2 AANWEZIGHEID VAN TOXINE A EN TOXINE B GENEN ..............................................................................................51
5.5.3 AANWEZIGHEID VAN BINAIRE TOXINEGENEN ........................................................................................................51
6. REFERENTIES .............................................................................................................................................. 53
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