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Contents

1 Abbreviations 6

2 Introduction 8

2.1 Clinical relevance and pathogenicity of Staphylococcus aureus . . . . . . . 8

2.2 Antibiotic resistance of S. aureus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10

2.3 Vaccination strategies against S. aureus . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11

2.3.1 Active immunisation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11

2.3.2 Passive immunisation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12

2.3.3 Antibacterial function of immunoglobulins . . . . . . . . . . . . . . . 13

2.4 Aim of the study . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14

3 Material and Methods 15

3.1 Material . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15

3.1.1 Chemicals and enzymes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15

3.1.2 Bacteria and culture media . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15

3.1.3 Buffers and solutions . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16

3.1.4 Technical equipment . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 19

3.1.5 Consumables . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20

3.1.6 Kits . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20

3.1.7 Oligonucleotides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21

3.1.8 Antibodies . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22

3.2 Methods . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23

3.2.1 Depletion of speciﬁc IgGs from IVIG . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23

3.2.2 S. aureus growth curves . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 23

3.2.3 RNA isolation . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24

3.2.4 Synthesis and labelling of cDNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24

3.2.5 Hybridisation of microarrays . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25

3.2.6 Analyses of microarrays . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25

3.2.7 Quantitative realtime PCR (qPCR) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26

3.2.8 Isolation of S. aureus anchorless cell wall (ACW) proteins . . . . . . 26

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